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PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),Polymerase Chain Reaction)是一種用于放大擴(kuò)增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù),它是由美國(guó)科學(xué)家Kary Mullis于1983年發(fā)明的,因此他在1993年獲得了諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng),PCR技術(shù)在生物醫(yī)學(xué)、遺傳學(xué)、基因組學(xué)等領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用。

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PCR的原理
PCR技術(shù)利用DNA聚合酶對(duì)特定DNA片段進(jìn)行復(fù)制,通過(guò)多次循環(huán),將原始DNA片段數(shù)量呈指數(shù)級(jí)增加,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)DNA片段的擴(kuò)增。
PCR的步驟
1、變性:將待擴(kuò)增的DNA模板加熱至95℃,使雙鏈DNA解離成單鏈。
2、退火:將溫度降低至5065℃,使引物與單鏈DNA模板的互補(bǔ)序列結(jié)合。
3、延伸:將溫度升高至72℃,DNA聚合酶在引物的引導(dǎo)下合成新的DNA鏈。
4、重復(fù)以上步驟(通常為2040次),實(shí)現(xiàn)目標(biāo)DNA片段的擴(kuò)增。
PCR的關(guān)鍵因素
1、引物(Primer):是一段與目標(biāo)DNA片段互補(bǔ)的短鏈DNA,用于指導(dǎo)DNA聚合酶合成新的DNA鏈。
2、DNA模板:待擴(kuò)增的目標(biāo)DNA片段。
3、DNA聚合酶:用于在引物的引導(dǎo)下合成新的DNA鏈。
4、dNTPs(脫氧核苷酸三磷酸鹽):作為新合成DNA鏈的原料。
PCR的應(yīng)用
1、基因克?。簩⒏信d趣的基因從染色體上切下來(lái),連接到載體上,然后通過(guò)PCR擴(kuò)增,再將擴(kuò)增的基因插入到宿主細(xì)胞中,從而獲得大量的重組子。
2、基因突變分析:通過(guò)比較野生型和突變型基因的PCR產(chǎn)物,可以確定突變位點(diǎn)。
3、病原體檢測(cè):通過(guò)檢測(cè)病原體特異性基因的PCR產(chǎn)物,可以診斷感染性疾病。
4、基因表達(dá)分析:通過(guò)檢測(cè)目的基因的mRNA水平,可以了解基因在不同組織或發(fā)育階段的表達(dá)情況。
文章題目:什么是pcr
文章來(lái)源:http://www.dlmjj.cn/article/codsosd.html


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